紫外分光光度計*簡 介

　　紫外分光光度計是每個化學(xué)分析實驗室必備的常用儀器設(shè)備之一，適用于對紫外、可見光譜區(qū)域內(nèi)物質(zhì)的含量進行定量和定性分析，可廣泛應(yīng)用于工廠、學(xué)校、冶金、農(nóng)業(yè)、食品、生化、環(huán)保、石油化工、醫(yī)療衛(wèi)生等單位的基礎(chǔ)實驗室。

　　紫外分光光度計*歷史發(fā)展

　　1852 年，比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729 年和朗伯(Lambert)在 1760 年所發(fā)表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液層厚度相等時，顏色的強度 與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ)，這就是**的朗伯比爾定律。1854 年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域，并且設(shè)計了**臺比色計。到 1918 年，美國國家標準局制成了**臺紫外可見分光光度計。此后，紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進，又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏 度和準確度也不斷 提高，其應(yīng)用范圍也不斷擴大。 紫外可見分光光度法從問世 以來，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上，促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。

　　紫外分光光度計*工作原理

　　紫外分光光度法定量測定的依據(jù)是比耳定律，即物質(zhì) 在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比 。許多有機化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對有機物質(zhì)進行定性鑒定，結(jié)構(gòu)分析及定量測定.其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機物質(zhì)，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì) 的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

　　紫外分光光度計*種 類

　　分光光度計從分光元件來講可分為棱鏡式和光柵式兩種，也有光柵加棱鏡的**分光光度計，現(xiàn)今的分光光度計大部分采用光柵分光。從結(jié)構(gòu)上來區(qū)分可分為單光束、準雙光束、雙光束和雙波長分光光度計

　　紫外分光光度計*特 點

　　強勁的儀器性能：極其優(yōu)良的光學(xué)系統(tǒng)，先進的電子學(xué)系統(tǒng)，高水準的機械系統(tǒng)，保證了0.010%T的超低雜散光。

　　穩(wěn)定可靠的品質(zhì)：雙光束動態(tài)反饋比例記錄測光系統(tǒng)保證了基線穩(wěn)定性。

　　氘燈、光電倍增管等關(guān)鍵器件均用進口件，保證儀器的穩(wěn)定可靠和長壽命。

　　精準的測量：采用進口**全息光柵，進一步降低儀器的雜散光，使儀器分析更加準確。

　　輕松高效的人機對話：基于Windows環(huán)境設(shè)計的UVWin中文操作軟件，提供了豐富的儀器控制和操作功能，簡單易用，靈活高效，輕松滿足使用者的分析需求。

　　優(yōu)異的可擴展性：有蠕動進樣器、超微量池架、恒溫池架、光學(xué)積分球、鏡面反射、光纖附件和比色皿系列等大量用戶可選專用附件，使儀器的應(yīng)用范圍大大擴展。

　　設(shè)備維護簡單方便：獨特的插座式鎢燈和氘燈，換燈時免去光學(xué)調(diào)試，使設(shè)備儀器調(diào)試、維護更加簡單方便。

　　強大而便捷的軟件分析助手——UVWin5.0

　　先進的Windows多文檔界面，UVWin5.0控制軟件，能夠?qū)崿F(xiàn)多模式同時顯示，測量方式切換瞬間完成。主體界面提供所有的功能，是用戶進行軟件操作的基礎(chǔ)。包括：菜單、工具按鈕、測量模塊、狀態(tài)信息等。

　　◇ 四大常規(guī)測量功能

　　光度測量、定量測定、光譜掃描、時間掃描

　　◇ 三維譜圖功能

　　提供將多次測量的光譜曲線組合為三維圖形進行顯示、編輯和打印的功能。

　　◇ DNA\蛋白質(zhì)測定功能

　　用戶可以利用此功能對DNA/蛋白質(zhì)進行濃度測量，同時還可以設(shè)置不同分析方法，從而滿足不同的需要。

　　◇ 軟件遵循GLP規(guī)范

　　多用戶管理：允許管理員創(chuàng)建擁有不同權(quán)限的用戶和組;每個用戶登陸軟件需要輸入相應(yīng)的帳號和密碼;針對一般用戶可實現(xiàn)測量數(shù)據(jù)的保護功能。

　　日志記錄功能：自動記錄用戶的操作;日志文件采用更為可靠的數(shù)據(jù)庫格式保存;管理員可對日志進行分類查閱和其他處理。

　　二進制文件保存：測量數(shù)據(jù)的保存格式采用二進制格式;二進制格式大大加強了數(shù)據(jù)的保密程度;同時也節(jié)省了磁盤空間。

　　質(zhì)量控制功能：可根據(jù)用戶的設(shè)置對測量數(shù)據(jù)進行監(jiān)控;超出控制范圍的數(shù)據(jù)系統(tǒng)將會顯示提示信息、進行顏色標記或自動重新測量。

　　報告輸出功能：可實現(xiàn)與其他系統(tǒng)共享數(shù)據(jù)的功能;可將測量結(jié)果保存為Microsoft Word格式、Microsoft Excel格式、文本文件格式;可對報告格式進行個性化的設(shè)置;可提前預(yù)覽結(jié)果報告的打印效果。

　　高靈敏度-世界獨一無二的三檢測器系統(tǒng)：

　　安裝三個檢測器：光電倍增管用于紫外區(qū)和可見區(qū);InGaAs和PbS檢測器用于近紅外區(qū)。InGaAs檢測器覆蓋了光電倍增管和PbS檢測器的薄弱范圍，保證了整個測量范圍的高靈敏度。

　　高分辨率-寬測試范圍和超低雜散光：

　　采用高性能的雙單色器實現(xiàn)了超高的分辨率和超低的雜散光。測量范圍覆蓋紫外、可見和近紅外區(qū)域，滿足多種領(lǐng)域的測量要求。UVProbe實現(xiàn)了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。另外還可以加載膜厚測定、色彩分析等軟件。

　　紫外分光光度計*技術(shù)參數(shù)

　　波長范圍：190 nm～1100 nm

　　光源：進口鎢燈 進口氘燈

　　光學(xué)系統(tǒng)：雙光束 1200 線平面光柵

　　透射比準確度：±0.5%T

　　透射比重復(fù)性：±0.2%T

　　波長準確度：≤±0.3 nm

　　波長重復(fù)性： ≤0.1 nm

　　雜散光 ≤0.05 %T (220 nm NaI 溶液)

　　光度范圍 -3 A～3 A

　　噪聲： ≤0.0003 Abs/h

　　基線平直度：≤±0.0005A

　　光譜帶寬：1nm

　　漂移：≤± 0.0004 Abs/h

　　光度準確度 ±0.3 %T (0～100 %T)

　　光度重復(fù)性 0.001 Abs (0～0.5 Abs)

　　測量模式：透光率 吸光度 能量 反射率

　　顯示方式：通過連接 PC，方便您的存儲和操作方便

　　掃描方式：快 中 慢 三檔可調(diào)

　　波長及設(shè)置方式：任意設(shè)定

　　鍵盤：薄膜式按鍵

　　檢測器：進口硅光電池

　　電源：AC 220V/50Hz 或 AC110V/60Hz

　　主機：重量 30kg 儀器尺寸：658*468*264

　　紫外分光光度計*應(yīng) 用

　　1 檢定物質(zhì)

　　根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是*大吸收波長雖 ax 和摩爾吸收系 數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外 的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的*大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。

　　2 與標準物及標準圖譜對照

　　將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測 定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標樣，也可以和現(xiàn)成的標 準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確，精密 度高，且測定條件要相同。

　　3 比較*大吸收波長吸收系數(shù)的一致性

　　4 純度檢驗

　　5 推測化合物的分子結(jié)構(gòu)

　　6 氫鍵強度的測定

　　實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來 判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑 。

　　7 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定

　　8 反應(yīng)動力學(xué)研究

　　9 在有機分析中的應(yīng)用有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué)，它是 在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。

　　紫外分光光度計*用 途

　　紫外-可見光譜儀涉及的波長范圍是0.2--0.8微米(對應(yīng)波數(shù)50000-12500厘米-1)，它在有機化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查，有機分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面，可測定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量，也可以測定物質(zhì)的離解常數(shù)，絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)，物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點以及在高效液相色譜中作檢測器等。主要使用范圍是凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機化合物，根據(jù)在特定吸收波長處所測得 的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。目前，廣泛應(yīng)用于冶金、機械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗、生物化學(xué)、環(huán)境保護、食品、 材料科學(xué)等領(lǐng)域的生產(chǎn)， 教學(xué)和科研工作中，

　　紫外分光光度計*選擇方法

　　我們在選擇各種儀器時，都有一定的標準，如測量精度、或者測量范圍。而在選擇紫外分光光度計時，我們考慮的是光學(xué)構(gòu)造、光譜范圍、樣品類型和分析工具。

　　光學(xué)構(gòu)造主要是指紫外分光光度計給出的光是單光束還是雙光束。單光束是通過單束光進行測量，在測量過程中給定波長，然后通過被測物和對照物得到吸光結(jié)果。而雙光束是通過一個斬光輪將光束一分為二。

　　光源包括紅外線、紫外線和可見光。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。

　　分光光度計通常使用光電倍增管和光敏二極管來測量吸光值。

　　在大部分的樣品類型中，分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。

　　大部分單機型的分光光度計包含了驅(qū)動儀器運行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器，通常與PC機一起聯(lián)用，需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。

　　紫外分光光度計*檢驗方法

　　一、波長準確度的檢驗 用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值, 如果測出的值與濾光片標準值之差超出規(guī)程規(guī)定, 則需要進行波長調(diào)節(jié)

　　二、 透射比正確度的檢驗 用透射比標準值分別為10% 、20% 、30 %左右的光 譜中性濾光片, 可見光區(qū)分別在440、546、635nm 波長處,空氣為參比, 分別測量各濾光片的透射比, 紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235 、257、313、 350nm 波長處, 以高氯酸溶液為參比, 測量其透射比。

　　三、穩(wěn)定度的檢驗 在零點不受光的條件下, 用零點調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零 點, 觀察3 分鐘讀取透射比的變化, 即為零點穩(wěn)定性。 在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm 處, 調(diào)節(jié)零點后, 蓋上樣品室蓋( 打開光門) , 使光電管受光, 調(diào)節(jié)透射 比為95% ( 數(shù)顯儀器調(diào)至100% ) 觀察3 分鐘讀取透 射比的變化, 即為光電流穩(wěn)定性。

　　四、 雜散光的檢驗 可見分光計棱鏡式儀器在420nm 處, 光柵式儀器在 360nm 處, 紫外分光計在220nm 處分別用符合規(guī)定 的截止濾光片, 以空氣為參比, 測量其透射比值, 即為 儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率

　　紫外分光光度計*操作方法

　　一、開機

　　開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，確認電源是否連接。打開儀器電源開關(guān)，等待儀器自檢通過，自檢過程中禁止打開樣品室。

　　二、使用

　　自檢結(jié)束后(7個項目均出現(xiàn)ok字樣)，儀器進入主菜單，屏幕顯示如下七個功能項：1.光度測量;2.光譜測量;3.定量測量;4.動力學(xué)測量;5.數(shù)據(jù)處理;6.多波長測定;7.系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)定。儀器經(jīng)30min熱穩(wěn)定后，就可以進入正常測量。

　　1.光度測量 測定一定波長下的透光率(t%)或吸光度值(a)

　　在主菜單中選中[光度測量]項后，按[enter]鍵進入此功能塊 → 按[goto wl]鍵進入波長設(shè)置用數(shù)字鍵輸入你所需的波長值→ 按[enter]鍵確認→ 屏幕提示：請稍等……，儀器自動將波長移動到你所需測定的波長值→ 按[f1]鍵，選擇測定透光率(t%)或吸光度值(a) → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r位和s1位，關(guān)上樣品室蓋→ 按[f3]鍵，儀器自動將比色皿架r位置移動到光路中(即空白溶液)，屏幕上顯示cell=r → 按[auto zero]鍵，儀器自動對空白溶液調(diào)零。屏幕提示：請稍等…… → 按[f2]鍵，比色皿架移動到s1位 (待測樣品),屏幕上顯示cell=s1 → 按[f4]鍵測量t%或a值

　　測量完成后

　　1)打印輸出數(shù)據(jù)，按[start/stop]鍵

　　2)返回主菜單，按[mode]鍵

　　2. 光譜測量 波長掃描或光譜掃描，可直接測定一段波長范圍內(nèi)的光譜圖和峰值谷值數(shù)據(jù)

　　在主菜單中選中[光譜測量]項后，按[enter]鍵進入此功能塊 → 根據(jù)需要設(shè)定測量模式、掃描范圍、記錄范圍、掃描速度、采樣間隔、掃描次數(shù)、顯示模式各參數(shù)。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向鍵到達設(shè)定行，進行參數(shù)的修改，并按[enter]鍵確認 → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r位和s1位，關(guān)上樣品室蓋→ 按[f3]鍵，儀器自動將比色皿架r位置移動到光路中(即空白溶液)，屏幕上顯示cell=r → 按[f1]鍵進行基線校正。屏幕提示：基線校正…… → 按[f2]鍵，比色皿架移動到s1位 (待測樣品),屏幕上顯示cell=s1 → 按[start/stop]鍵開始光譜掃描 → 屏幕顯示掃描圖譜

　　掃描結(jié)束后

　　1)打印結(jié)果譜圖，按[f4]鍵

　　2)直接讀取峰谷值，按[f2]鍵，屏幕??示“請輸入峰/谷檢測靈敏度”(默認值為3)，按[enter]鍵確認

　　3)存儲圖譜，獲取整個波長范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)，按[f3]鍵，用[→]、[←]方向鍵選擇10個數(shù)字和26個字母組成文件名，按[enter]鍵確認，按[f4]存儲，按1-8數(shù)字鍵確定文件序列號

　　4)修改譜圖坐標范圍，按[f1]鍵。修改完畢后，按[start/stop]鍵確認后，譜圖將按新設(shè)定坐標被刷新

　　5)返回上**菜單，按[mode]鍵

　　3. 定量測定 建立濃度曲線，直接測定樣品的濃度

　　主菜單中選中[定量測定]項后，按[enter]鍵進入此功能塊 → 根據(jù)需要設(shè)定測量波長、測量單位、測量方法各參數(shù)。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向鍵到達設(shè)定行，進行參數(shù)的修改，并按[enter]鍵確認

　　3.1 k系數(shù)法已知斜率k和截距b，測出樣品的吸光度值后待入公式就可算出濃度值

　　在測量方法中選擇k系數(shù)法，并按[enter]鍵確認 → 按[f2]鍵，將k值和b值輸入，按[enter]鍵確認 → 打開樣品室蓋，在當前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 將樣品放入比色皿架中 → 按[start/stop]鍵進入數(shù)據(jù)測量界面→ 按[f2]鍵移動比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　3.2單點標定法測量一個標準樣品的吸光度與坐標零點建立工作曲線，測定未知樣品濃度

　　在測量方法中選擇單點標定法，并按[enter]鍵確認 → 按[f2]鍵修改單點 → 按數(shù)字鍵輸入標準樣品的濃度值 → 按[enter]鍵→ 打開樣品室蓋，在當前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 將空白樣品換成標準樣品→ 按[start/stop]鍵測量標樣的吸光度并顯示 → 將樣品放入比色皿架中 → 按[start/stop]鍵進入樣品測量界面 → 按[f2]鍵移動比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　3.3多點標定法測量已知濃度的一系列標準樣品吸光度，建立工作曲線來測定未知濃度

　　在測量方法中選擇多點標定法，并按[enter]鍵確認 → 打開樣品室蓋，在當前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 按[f2]鍵重新標定 → 按數(shù)字鍵輸入標準樣品數(shù) → 按[enter]鍵確認 → 將標準樣品依次放入比色皿架r、s1、s2位……關(guān)上樣品室蓋 → 按[f3]移動比色皿架r位到光路 → 按[enter]鍵確認 → 按數(shù)字鍵輸入標樣濃度值，按[enter]鍵確認 → 按[start/stop]鍵測量標樣的吸光度→ 按[enter]鍵確認 → 按[f2]鍵移樣品位s1到光路，同樣的方法測量所有標樣的吸光度 → 按[f1]鍵生成方程曲線，顯示該曲線的斜率k、截距b、相關(guān)系數(shù)r → 按[mode]鍵返回定量測量菜單 → 按[start/stop]鍵進入數(shù)據(jù)測量菜單 → 放入樣品 →按[f2]鍵移動比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　6.多波長測定 同時測定幾個波長下的透光率(t%)或吸光度值(a)

　　主菜單中選中[多波長測定]項后，按[enter]鍵進入此功能塊 → 按[f3]鍵設(shè)定測量波長數(shù)目和樣品池個數(shù)，按[enter]鍵確定 → 按數(shù)字鍵輸入相應(yīng)波長值 → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r、s1、s2位……，關(guān)上樣品室蓋 → 按[start/stop]鍵開始測量

　　測量完成后

　　1)打印輸出數(shù)據(jù)，按[f4]鍵

　　2)返回主菜單，按[mode]鍵

　　三、關(guān)機

　　將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。

　　注意事項：

　　1.開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。

　　2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。

　　3.測定時，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時清理干凈。

　　4.實驗結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。

　　問題處理：

　　1、如果儀器不能初始化，關(guān)機重啟;如不成功，請向管理老師反映。

　　2、如果吸收值異常，依次檢查：波長設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長，并重新調(diào)零)、測量時是否調(diào)零(如被誤操作，重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(測定紫外波段時，要用石英比色皿)、樣品準備是否有誤(如有誤，重新準備樣品)。

　　紫外分光光度計*校正方法

　　1.波長 的 準確度 試驗 以儀 器 顯 示的 波長 數(shù) 值與 單 色 光的 實際 波 長值 之 間誤 差表示，應(yīng)在±1.0nm 范圍內(nèi)。可用儀器中氘燈的 486.02nm 與 656.10nm 譜線進行 校正。

　　2.吸收度的準確度試驗

　　3.雜散光的試驗

　　4.波長重現(xiàn)性試驗

　　5.分辨率試驗

　　紫外分光光度計*注意事項

　　1.儀器工作電壓一般為220V, 允許 10% 的電壓波動。為保持 光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性, 在電源電壓波動較大的實驗室*好配備穩(wěn)壓器。

　　2.一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在0.2～0.8之間的誤差較小。郎伯-比爾定律 只適用于稀溶液,太大了，A-C曲線已經(jīng)偏離了直線性，越大彎曲越嚴重，需要稀釋樣品。

　　3.拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

　　4.測定有色溶液吸光度時，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色 溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，通常都按由稀到濃的順序測 定，以減小測量誤差。

　　5.清洗比色皿時，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機物沾污， 可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1∶2)浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化 性強的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。

　　6.每次做完實驗時，應(yīng)立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水 紙吸干，以保護透光面。晾干后，放入吸收池盒中，防塵保存。

　　7.儀器的光柵、反射鏡**不能擦拭，否則將損壞儀器光學(xué)表面，增加雜散光。

　　8.為了延長光源使用壽命, 在不用時不用開光源燈。如果光源 燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定, 應(yīng)及時更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置, 不要用手直接接觸窗口或燈泡, 避免油污沾附, 若不小心接觸過, 要用無水乙醇以擦拭。

　　9.單色器是儀器的核心部分, 裝在密封盒內(nèi), 不能 拆開, 為防止色散元件受潮發(fā)霉, 必須經(jīng)常更換干燥劑。

　　10.必須正確使用吸收池, 保護吸收池光學(xué)面

　　11.光電轉(zhuǎn)換元件不能長時間曝光, 應(yīng)避免強光照射或受潮積塵。

　　紫外分光光度計*保養(yǎng)和維護方法

　　1.為了延長光源的使用壽命，在使用時應(yīng)盡量減 少開關(guān)次數(shù)，短時間工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。 剛關(guān)閉的光源燈不要立即重新開啟。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時更換新燈。

　　2.要經(jīng)常更換單色器盒的干燥劑，防止色散元件受潮生霉。儀器停用期間，應(yīng)在樣品室和塑料儀器罩內(nèi)放置防潮硅膠，以免受潮，使反射鏡 面有霉點及沾污。同時選擇波長應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動， 不可用力過猛。

　　3.正確使用吸收池，保護吸收池光學(xué)面。不能將光學(xué)面與手指、硬物或臟 物接觸，只能用擦鏡紙或絲綢擦拭光學(xué)面;不得在火焰或電爐上進行加 熱或烘烤吸收池。生物樣品、膠體或其他在池體上易形成薄膜的物質(zhì)要用適當?shù)娜軇┫礈?有色物質(zhì)污染，可用3mol/lHCL和·等體積乙醇的混合液洗滌。

　　4.電壓波動較大時，要配備有過壓保護的穩(wěn)壓器。

　　5. 停止工作時，必須切斷電源，蓋上防塵罩。儀器若長期不用要定期通電 20—30分鐘。

　　6.首先在使用儀器前必須認真閱讀儀器說明書用戶應(yīng)當了解儀器的校正法如波長精度的校正光源燈的調(diào)整等在儀器使用說明書中都有詳細介紹儀器說明書應(yīng)當妥善保存以便隨時查閱。

　　7.儀器必須設(shè)專人保管使用使用者應(yīng)熱知儀器各旋按鍵的功能和作用儀器使用前必須預(yù)熱5-30分鐘,預(yù)熱時除打開總電源開關(guān)和所選用的光源開關(guān)外應(yīng),同時將擋光桿退出光路使光電倍增管得到光照并調(diào)粗調(diào)旋鈕使數(shù)字電壓表在量 程旋鈕置腸檔時顯示接近100.0,這樣光電倍增管及負高壓 控制系統(tǒng)都進入預(yù)熱狀態(tài),使卞時更加穩(wěn)定

　　8.預(yù)熱完畢,儀器進入使用狀態(tài),將檔光桿推入光路,數(shù)字電壓表應(yīng)顯示0.00.否則可調(diào)儀器右側(cè)卜方調(diào)零旋鈕,使 數(shù)字電壓表顯示0.00允許誤差為末位士2個字,然后將 “參比”置于光路,調(diào)節(jié)粗調(diào)細調(diào)旋鈕,使數(shù)宇電壓表顯 示100.0,再將量程開關(guān)100百分之T檔轉(zhuǎn)換到0-2A檔，數(shù)字電壓表應(yīng)顯示0.000，允許誤差為士0.002.

　　9.如測試數(shù)據(jù)重復(fù)性不好，即同一樣由于某種原因使儀器外殼帶電，給人身和儀器帶來危害

　　10.對儀器工作環(huán)境的要求分光光度計應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺上, ( 周圍不應(yīng)有強磁場, 以防電磁干擾) , 室內(nèi)溫 度應(yīng)保持在( 10-30).室內(nèi)應(yīng)干燥, 相對濕度 宜控制在< 85% , 室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體, 光線不宜過強。

　　紫外分光光度計*故障分析與排除

　　故障現(xiàn)象一

　　儀器開機可見區(qū)(紫外區(qū))不顯示100.00，只顯 示0.000.引起此類故障的原因有1.鹵鎢燈( 氛 燈 )位置偏移,使光斑未能確地進人人射狹縫 2.截止濾光片位置偏移。 對于前者,通過檢查可見(紫外光 )光斑人射 狹縫上的位置,重新調(diào)整鹵鎢燈 (氖燈) 裝 配位置加以排除!后者則可通過仔細調(diào)整光片 位置予以排除。

　　故障分析與排除

　　故障現(xiàn)象二

　　關(guān)上試樣室,開啟儀器(參照樣品為空氣 )儀器顯示為0.000 原因為截止濾光片組旋轉(zhuǎn)位置( 偏移 )不正確。調(diào)整入等于 550nm時， 在凹面鏡為黃白相間各半光斑即可。

　　故障現(xiàn)象三

　　儀器開機全波長不顯示100.0，只顯示0.000 原因為1.單色器內(nèi)光柵脫落2.試樣槽位時落位不正確。前者可換 上光柵,后者則重新調(diào)整單色器內(nèi)光路使光斑正確經(jīng)出射縫進人試 樣室,并用槽汝濾光片,采用逐點檢驗波長以排除之。

　　常見故障排除

　　1 開機不工作且電源指示燈不亮 依次檢查電源線插頭、2A 保險絲和電源開關(guān)是否完好, 若有損壞, 則予以 更換。

　　2 數(shù)據(jù)顯示不穩(wěn)定 確保預(yù)熱時間在30 min 以上、電源電壓為 220 V 且無突變。若儀器振動 過大, 則應(yīng)重新定位安裝、調(diào)試。

　　3 吸光度溢出且顯示 E 2 或 ∀∀ ∀ ∀ 被測溶液濃度過大而導(dǎo)致吸光度溢出是正?，F(xiàn)象, 重新開機后一般會自動消失。 檢查在吸光度擋時樣品室是否關(guān)閉, 否則應(yīng) 關(guān)閉樣品室。

　　4 能量不足且顯示 E 確認試樣槽位置已固定好并且內(nèi)無異物, 然后觀察鎢燈是否點亮。重新調(diào)整鎢燈位置, 使其光斑聚集在狹縫正中。 用觀察法和替換法 , 確認! 15 V 電源板和前置放大電路板完好后, 再檢查光路中濾光片、 ! , 反射鏡、 光柵、準直鏡等是否臟污。若以上器件沾污, 應(yīng)戴上稱量專用手套, 小心清潔其表面。如果鏡面霉變, 需將其更換。更換時切勿用手接觸鏡面, 也不要對著鏡面講話, 以免鏡面被唾液污染。 用替換法檢查光電管是否完好。用手動方法調(diào)整光路, 對常用波長 點逐一測試。把濾紙置于樣品室內(nèi)光路中, 檢測單色器輸出的各種單色光, 各波長的單色光均應(yīng)正確對應(yīng), 關(guān)閉樣品室后能夠調(diào)零。

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